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為確保細胞在凍存過程中保持活力,正確使用DMSO凍存液至關(guān)重要。以下是關(guān)于如何正確使用DMSO凍存液的指南:
1. 選擇合適的細胞:選擇對數(shù)生長期、生長狀態(tài)良好的細胞進行凍存。
2. 準備凍存液:配制含10%DMSO(可根據(jù)細胞類型調(diào)整至5-12%)和適當比例的基礎培養(yǎng)基或血清的凍存液。確保凍存液新鮮配置或保存得當。
3. 清洗細胞:用PBS清洗細胞,去除殘留的培養(yǎng)基和血清。
4. 收集并懸浮細胞:通過離心收集細胞,并用凍存液輕輕懸浮細胞,確保細胞均勻分布。
5. 分裝與標記:將細胞懸液分裝至凍存管中,每管1~1.5ml,并標記細胞的名稱、日期和操作者。
6. 控制降溫速率:將凍存管放入冷凍器中,逐漸降低溫度至-80°C或更低,降溫速率控制在-1~-2°C/min。在-25°C以下時,可增至-5~-10°C/min。
7. 長期儲存:細胞到達-80°C或更低溫度后,可移至液氮容器中長期保存。
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