ProteanFect和陽離子脂質(zhì)體轉染(Lipo)是兩種常用的轉染技術,它們在實驗原理、操作步驟和適用范圍上存在一些區(qū)別。
實驗原理
Lipo轉染:
利用帶正電的陽離子脂質(zhì)體與帶負電的DNA通過靜電作用力結合形成DNA-脂質(zhì)體復合物。
復合物被細胞膜表面吸附后通過內(nèi)吞作用進入細胞,在內(nèi)涵體內(nèi)釋放,可能通過膜融合或內(nèi)吞體破裂等方式將DNA釋放到細胞質(zhì)中。
最終DNA通過細胞質(zhì)轉運到細胞核,實現(xiàn)外源基因的表達。
ProteanFect轉染:
操作步驟
Lipo轉染:
將核酸與Lipofection Reagent混合形成復合物。
將復合物加入細胞培養(yǎng)體系中進行轉染。
經(jīng)過12-72小時后進行基因表達檢測。
ProteanFect轉染:
制備ProteanFect轉染體系。
將ProteanFect轉染體系加入待轉染細胞。
根據(jù)細胞類型孵育15-120分鐘,最快可在結束反應1小時后觀察到目的基因的表達。
適用范圍
Lipo轉染:
ProteanFect轉染:
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